在生物制药、精细化工与天然产物提取领域，工业级层析柱长期运行后易因样品残留、杂质吸附或微生物滋生导致柱效下降、背压升高与峰形拖尾。科学、系统的清洗
工业级层析柱是恢复柱性能、延长使用寿命、保障批次间一致性的关键。
1、清洗前准备
关闭系统泵与阀门，卸除层析柱压力。确认清洗溶剂与柱填料（如琼脂糖、硅胶、聚合物）的兼容性，避免溶胀或塌陷。准备去离子水、缓冲液、再生剂与消毒液，连接清洗管路，确保流向与层析方向一致（通常为正向冲洗）。
2、初步冲洗
用5-10倍柱体积（CV）的去离子水低流速冲洗，去除盐类、缓冲液及水溶性杂质。观察流出液澄清度，直至电导率接近进水值。此步可有效降低后续清洗剂消耗。
3、去蛋白清洗
针对蛋白类样品残留，使用0.5-1MNaOH溶液循环清洗1-2小时（琼脂糖基质耐受性强，硅胶柱禁用）。NaOH可水解蛋白质、灭活内毒素并去除脂类。流速控制在操作上限的50%以下，避免压降突增。结束后用去离子水冲洗至中性。
4、去脂与疏水杂质清洗
对于疏水性杂质或脂类残留，采用30-70%乙醇或异丙醇清洗2-3CV。部分系统可用含0.1-0.5%TritonX-100的缓冲液短时冲洗，增强去污力。注意有机溶剂对密封圈的溶胀影响，清洗后充分水化。
5、在位消毒（SIP）
在GMP环境中，定期执行在位消毒。常用0.5-1.0MNaOH溶液循环1小时，或200ppm次氯酸钠冲洗30分钟。结束后用大量去离子水冲洗至无残留，防止氧化损伤填料。
6、再生与平衡
清洗后，用初始平衡缓冲液（如20mMPBS）冲洗5-10CV，使填料恢复离子状态与pH环境。检测流出液pH与电导稳定，方可重新上样。
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