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离子交换层析柱的定期保养机制介绍

更新时间:2025-11-06浏览:4次
   离子交换层析柱作为生物制药、蛋白质纯化及实验室分离纯化的核心工具,其性能直接决定目标分子的回收率、纯度与实验重复性。然而,填料老化、柱床塌陷、流路堵塞等问题常因维护不当而提前出现。尤其对于价格昂贵的预装柱或自制柱,建立科学、系统的定期保养机制,是延长离子交换层析柱使用寿命、保障分离效果的关键。

 


  一、每次使用后:即时清洗与保存
  冲洗残留样品与缓冲盐:先用5–10柱体积(CV)的去离子水洗去盐分,再用20%乙醇或20mMNaOH(根据填料耐受性)冲洗,杀灭微生物并去除疏水性污染物;
  正确保存介质:强阴/阳离子交换填料通常保存于20%乙醇+0.02%防腐溶液中,4℃避光存放;切勿长期置于高盐或纯水中,以防填料收缩或滋生细菌;
  密封柱两端接头,防止干裂或污染。
  二、每周维护:流路清洁与密封检查
  检查柱体接头、筛板是否渗漏或松动;
  若用于复杂样品(如细胞裂解液),建议每周用0.5–1.0MNaOH反向冲洗1–2CV(确认填料兼容),清除内毒素与蛋白沉积;
  观察柱压是否异常升高,初步判断筛板是否堵塞。
  三、每月保养:柱效验证与床层评估
  进行柱效测试:使用标准蛋白(如细胞色素C、溶菌酶)或小分子(如丙酮)测定理论塔板数(N)和不对称因子(As)。若N下降>20%或As>1.5,提示柱床不均或填料劣化;
  检查柱床是否出现裂缝、气泡或沉降空隙——轻敲柱体观察液面是否波动,必要时重新匀浆装柱(仅适用于自制柱)。
  四、每季度:深度再生与系统兼容性检查
  执行完整再生程序:依次用高盐(1–2MNaCl)、NaOH、水、保存液冲洗;
  检查连接管路是否老化、接头是否磨损,避免引入颗粒堵塞筛板;
  核对填料说明书,确认当前使用pH、温度、溶剂是否在耐受范围内。

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